• 对于人脑胶质瘤骨桥蛋白的表达外科学 不要轻易放弃。学习成长的路上,我们长路漫漫,只因学无止境。


    神经胶质瘤

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    目的探索骨桥蛋白()在人脑胶质瘤中的功能、表达及其意义.方法采用及免疫组化染色方法检测脑胶质瘤组织和正常组织中骨桥蛋白.结果骨桥蛋白在胶质瘤组织细胞中表达,而在正常脑组织细胞中无表达,而且的表达浓度和胶质瘤恶性程度呈正相关.结论人脑胶质瘤中的表达和其恶性程度密切相关.

    神经胶质瘤;骨桥蛋白;免疫组织化学

    引言

    人脑胶质瘤侵袭性生长是术后复发和临床疗效差的主原因,过程涉及到细胞信号传导、细胞黏附、细胞迁移等多个环节.骨桥蛋白(,)是一种含有整合素结合序列的分泌型磷酸化酸性糖蛋白,它对于的黏附功能起重功能.整合素是的受体,通过细胞黏附序列识别整合素和细胞结合,刺激了细胞信号的传送途径,促进了细胞的黏附和迁移,促使了细胞向恶性发展[],我们采用免疫组化和方法,探索在脑胶质瘤中的表达.

    材料和方法

    .材料

    河南省人民医院/手术切除胶质瘤转移和正常脑组织标本例.按病理分级将胶质瘤分为Ⅰ~Ⅳ级,其中Ⅰ级例,Ⅱ级例,Ⅲ级例,Ⅳ级例,转移癌例,正常新万博体育手机版官方,新万博在线开户,新万博体育官网注册 脑组织例.

    .方法

    ..免疫组化染色采用染色三步法.试剂盒购于美国生物技术公司.按操纵说明进行各组的免疫组化染色.扼步骤/过氧化氢室温孵育,冲洗,浸泡,/山羊血清封闭;滴加适当比例稀释的一抗工作液,冲洗;滴加生物素标记二抗,冲洗;滴加辣根过氧化物酶标记物,显色剂()显色.阳性对照用已知表达阳性的组织切片,阴性对照用代替一抗,以胞浆/胞膜内出现棕黄色或棕色颗粒为阳性细胞...总的提取和①每.组织中加进,提取总并按说明书操纵.②逆转录反应总μ,./()μ,加进一定量处理水,使总体积少于μ,放℃.将反应体系立即置冰上,再加进/μ,/μ,.μ/.μ,./μ,用处理水定容于μ.℃,℃.③将逆转录产物进行扩增.引物是自行设计并由上海生物有限公司合成.新万博体育手机版官方,新万博在线开户,新万博体育官网注册上游引物序列为′′();下游引物序列为′′();内参照上游引物序列为′′();下游引物序列为′′().μ的反应体系中加进/μ,//μ,引物各μ,引物各μ,.μ/酶.μ,反转录产物μ,加处理水至μ.℃预变性,℃→℃→℃,个循环,℃,℃冷却后℃保存.④电泳及定量分析产物行/琼脂糖凝胶电泳,紫外灯下观察结果,凝胶成像系统分析灰度值,结果为灰度值/灰度值.




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